*  Некоторые грибы, называемые диморфными, склонны чередовать дрожжевую и гифальную фазы, что означает, что они также могут растут как гифы (нитевидные)

Поскольку они очень разнообразны, дрожжи могут быть встречается в самых разных средах обитания, особенно в средах с материалы, богатые сахаром. Их можно обнаружить на цветах, листьях растений и фрукты, а также на почве, глубоководных средах, поверхности кожи и даже кишечные тракты животных (теплокровных).

Хотя их можно найти во многих средах, дрожжам требуется влажная среда с достаточным количеством простых и растворимые питательные вещества для поддержки роста и размножения (Horst, 2010).

В то время как такие дрожжи, как Candica, могут вызывать инфекции (кандидоз) существуют полезные дрожжи, такие как:

• Пекарские дрожжи
• Пищевые дрожжи
• Пивные дрожжи
• Дистиллерные и винные дрожжи

Требования

• Вода
• Дрожжевая лепешка
• Капельница
9002 пластинки
• Пятна (указанные ниже)

Дрожжевой осадок содержит Saccharomyces Cerevisiae (сахароядные грибы) и поэтому могут быть использованы для получения дрожжей для наблюдения под микроскопом. Ниже приведена процедура, которая может быть использована для подготовки образец для наблюдения.

• Получите дрожжевой кекс (это может можно купить в специализированных пекарнях или в супермаркете)
• Нарежьте небольшой кусочек дрожжей лепешки и смешайте с водой, чтобы получилась пастообразная текстура
• Добавьте немного воды в сформировать раствор
• С помощью пипетки собрать и поместите каплю раствора на предметное стекло микроскопа
• Поместите крышку микроскопа проскользнуть и наблюдать под объективом с большим увеличением

При осмотре образца под высоким увеличении (1000х и выше) можно увидеть овальный (яйцевидный) организм, который являются дрожжи. Также можно наблюдать бутоны, которые можно увидеть на часть дрожжевых клеток.

Если в растворе было немного сахара, также обратите внимание на некоторые пузырьки в образце, которые являются результатом ферментации процесс микроорганизмами.

Флуоресцентная микроскопия может быть использована для для наблюдения за органеллами внутри дрожжевых клеток. Это особенно отличный метод, с помощью которого студенты могут получить представление о внутриклеточном распределение клетки и определить различные типы клеточных органелл.

Это может оказаться немного сложным, когда речь идет о дрожжах, учитывая, что они очень маленькие по размеру (по сравнению с другими клетками) и имеют клеточную стенку (Чалфи и Каин, 2005).

Для живых клеток дрожжей необходимо использовать ряд красителей использовать для увеличения контраста и возможности различать различные органеллы в клетках.

К ним относятся:

• DAPI для ядер
• FM4-64 для вакуолей
• DIOC6 для эндоплазматического ретикулум и митохондрии
• DASPMI для митохондрий
• Calcofluor White, который помогает окрашивать клеточную стенку

Дрожжи являются одними из самых маленьких эукариотических клеток диаметром от 5 до 10 мкм. По этой причине важно рассматривать их под большим увеличением. с помощью флуоресцентной микроскопии.

Здесь объективы с увеличением 60x или 100x с числовым диафрагма 1,4 рекомендуется для визуального наблюдения и максимальной яркости и разрешение соответственно.

При записи с помощью цифровой камеры (например, с помощью 6,8 x 6,8 мкм, квадратный пиксель), то рекомендуется увеличение 60x с числовая апертура 1,4 (Hašek, 2006).

См. также:

Микология в целом как область исследования

Грибы – виды, морфология и структура, использование и недостатки

Дальнейшее изучение плесени под микроскопом.

Возврат от дрожжей под микроскопом к экспериментам под микроскопом

Возврат в MicroscopeMaster Home

Мартин Чалфи и Стивен Р. Кейн (2005) Грин Флуоресцентный белок: свойства, приложения и протоколы.

Йиржи Гашек (2006) Флуоресцентная микроскопия дрожжей. Том 313 из серии «Методы молекулярной биологии», стр. 85-96.

Фельдманн, Хорст (2010). Дрожжи. Молекулярный и Био клетки.

Узнайте, как размещать рекламу на MicroscopeMaster!

Наблюдение за дрожжами под микроскопом » Клуб микроскопов

Мы привыкли считать, что дрожжи используются для приготовления хлеба, иногда пива или вина. Хотя это все здорово и все такое, на самом деле это не единственные виды дрожжей. Есть еще много разных типов дрожжей, которые могут делать много разных вещей.

Сегодня мы ответим на все ваши вопросы о дрожжах, такие как… Что такое дрожжи? Что он делает и где используется? Как его используют для приготовления хлеба и вина? Где живут дрожжи и как они размножаются? Как я могу наблюдать дрожжи под микроскопом?

Дрожжи — это одноклеточные эукариотические микроорганизмы из подцарства Дикарья царства Грибов. Существует более 1500 видов дрожжей, классифицируемых как сумчатые грибы, или тип Ascomycota, а также высшие грибы, или тип Basidiomycota.

Эти одноклеточные грибы в основном представляют собой бесполые организмы, выживают за счет органических веществ, таких как сахара, могут вызывать ферментацию различных фруктов, растений и побочных продуктов растений, а также могут быть источником некоторых инфекций.

Дрожжевая клетка может размножаться путем почкования или бинарного деления, а в некоторых случаях и путем полового размножения. Это быстро происходящие явления, которые можно легко наблюдать с помощью мощного оптического микроскопа.

Некоторые из многих видов дрожжей считаются полезными дрожжами, поскольку их можно использовать для приготовления выпечки и алкогольных напитков, таких как хлеб, пиво и вино. К ним относятся пекарские дрожжи, пивные дрожжи, дистилляционные дрожжи, винные дрожжи и пищевые дрожжи.

Обычно это работает путем брожения дрожжей путем «кормления» их сахаром, который, в свою очередь, позволяет им производить углекислый газ и спирт. Однако не все дрожжи можно использовать таким образом. Многие виды дрожжей вредны и могут вызывать инфекции, например дрожжи Candida.

Это увеличенное изображение пивных дрожжей с научным названием Saccharomyces cerevisiae. При 400-кратном увеличении вы можете четко увидеть детали дрожжевых клеток, включая их форму и ориентацию.

Процесс ферментации хлеба и алкогольных напитков во многом похож друг на друга, с основным отличием в том, какие ингредиенты требуются и как используются побочные продукты.

Для производства хлеба дрожжевые клетки ферментируют, используя сахара в муке, чтобы произвести этанол и углекислый газ. Этанол в конечном итоге испаряется, а углекислый газ заставляет тесто подниматься до и во время процесса выпечки.

Когда дело доходит до пива, злаки, такие как ячмень, используются в качестве источника сахара для ферментации, а произведенный этанол и углекислый газ задерживаются в напитке, делая его шипучим и алкогольным. То же самое и с вином, в котором используется сахар из винограда.

Здесь вы можете видеть различные увеличенные изображения пищевых продуктов в процессе их ферментации из-за того, что дрожжи потребляют сахар, содержащийся в пище. На самом деле, вы сможете не только увидеть дрожжи, но и идентифицировать определенные присутствующие бактерии и плесень.

Поскольку существует большое разнообразие дрожжей, вполне естественно, что они процветают в разных средах обитания, но общим является то, что эти среды обитания должны быть богаты сахаром и другими растворимыми питательными веществами, чтобы поддерживать рост и размножение дрожжей.

Это потому, что, хотя дрожжевые клетки не имеют хлорофилла и, следовательно, не могут производить себе пищу, это не означает, что дрожжи являются паразитическими организмами. Скорее, они выживают, поглощая другие органические вещества, такие как сахар.

Наиболее распространенными местами обитания дрожжей являются фрукты, цветы и листья растений, а также почва и глубоководная среда. Действуя как инфекции, дрожжи могут быть обнаружены на поверхности кожи и кишечных трактах теплокровных животных.

Эти дрожжевые клетки размножаются несколькими способами бесполого размножения, а именно бинарным делением и почкованием. Существуют также диморфные дрожжевые клетки, представляющие собой тип грибов, которые могут расти как дрожжи или гифы.

Здесь представлены микроскопические изображения дрожжей, псевдогиф и гиф. Вы можете видеть, насколько они разные: дрожжи выглядят как круглые или яйцевидные частицы, а гифы имеют удлиненные хвосты.

В некоторых случаях дрожжевые клетки подвергаются стрессовым условиям, и в этом случае они подвергаются половому размножению, в результате чего образуются споры.

Процесс митотического клеточного деления происходит с родительской дрожжевой клеткой для образования отростка в виде новой идентичной клетки, называемой почкой, которая остается связанной с родительской клеткой, пока не станет независимой путем отделения от родительской клетки. Интересно, что почкующиеся дрожжи принадлежат к типу Ascomycota и порядку Saccharomycetales.

Между тем, во время бинарного деления происходит митоз для репликации и деления генома, прежде чем, наконец, сформируется еще одна плазматическая мембрана, чтобы полностью создать новую идентичную клетку и отделить ее от родительской клетки. Это происходит посредством процессов репликации ДНК, сегрегации хромосом и цитокинеза.

Клетки дрожжей являются одними из самых маленьких эукариотических организмов с диаметром всего от 5 до 10 микрометров на клетку, поэтому их необходимо рассматривать под оптическими микроскопами с большим увеличением, установленным на высокое числовая апертура, разрешение и яркость.

Наилучшие настройки для наблюдения за дрожжами под микроскопом — это числовая апертура не менее 1,4 и увеличение объектива от 60 до 100 раз.

Изображение получено с сайта researchgate. net

Дрожжи можно исследовать под микроскопом с помощью двух различных методов микроскопии – микроскопии в светлом поле и флуоресцентной микроскопии. Во-первых, дрожжи и почки можно увидеть под светлым микроскопом с большим увеличением (1000x), например, составным микроскопом.

Это позволяет нам видеть микроскопические тела овальной формы, которые являются единицами протоплазмы дрожжевых клеток. Светлопольная микроскопия также подходит для наблюдения за процессом брожения дрожжей в сахарном растворе, а также за процессом их размножения путем почкования.

Тем временем клеточные органеллы внутри дрожжей и их внутриклеточное распределение можно идентифицировать с помощью флуоресцентного микроскопа. К ним относятся ядра, митохондрии, вакуоли, эндоплазматический ретикулум и клеточная стенка.

Взгляните на эту подборку увеличенных изображений почкующихся дрожжей под микроскопом. Как видите, хотя они могут показаться в основном одинаковыми, эти дрожжевые клетки на самом деле бывают разных размеров и форм.

Для приготовления предметного стекла для проб дрожжей проще всего использовать культивируемый тип дрожжей, например, дрожжевой осадок, который содержит тип грибка, питающегося сахаром. Его можно приобрести в магазинах для выпечки. Однако также можно использовать активные дрожжи и ложку сахара.

Ниже приведены способы подготовки предметного стекла с образцом дрожжей для просмотра и изучения под микроскопом. Вам понадобится всего несколько материалов и выполните пару простых шагов, чтобы создать жизнеспособный дрожжевой раствор.

Для приготовления предметного стекла дрожжевых клеток вам потребуется:

• Дрожжевая лепешка или активные дрожжи и сахар
• Одна чашка теплой воды
• Небольшая чаша для смешивания
• Палочки для смешивания или ложка
• Капельница или пипетка для лекарств
• Предметные стекла и покровные стекла
• Искусственные красители для окрашивания*

Ниже приведены процедуры подготовки образца к просмотру под микроскопом:

Отрежьте небольшой кусочек дрожжевой лепешки (примерно четверть лепешки) и смешайте с водой до он превращается в пастообразную текстуру, затем добавьте около пинты воды, чтобы получился разбавленный раствор. Вмешайте столовую ложку сахара, пока он полностью не растворится.

Или смешайте один пакет активных дрожжей с одной столовой ложкой сахара и одним стаканом теплой воды. Следите, чтобы не было комочков дрожжей или сахара. Перемешайте и дайте настояться почти час.

Также можно наблюдать за процессом пузырения хлебных дрожжей. Это можно сделать, используя активные сухие хлебные дрожжи, смешав раствор дрожжей в стеклянной бутылке и накрыв сверху баллоном примерно на 10 минут или пока баллон не надуется из-за образования углекислого газа.

Для окрашивания различных частей клеток дрожжей перед просмотром могут потребоваться различные методы окрашивания, поскольку дрожжевые клетки малы и их трудно увидеть на контрасте. Обычные красители включают калькофлуор белый, DAPI, DASPMI, FM4-64 и DIOC6.

Для окрашивания каждого красителя может потребоваться определенный набор процедур, поэтому при окрашивании дрожжевых клеток и других образцов лучше провести тщательное исследование и работать с квалифицированным специалистом.

Перенесите каплю раствора на предметное стекло с помощью пипетки или пипетки, затем осторожно поместите покровное стекло поверх предметного стекла, убедившись, что стекло идеально выровнено с предметным стеклом. Сотрите лишний раствор.

Поместите подготовленное предметное стекло на предметный столик микроскопа и рассмотрите его с помощью объектива с самым большим увеличением, которое должно быть либо 60-кратным, либо 100-кратным, создавая общее комбинированное увеличение от 600-кратного до 1000-кратного с окулярной линзой.

Как мы упоминали ранее, вы должны видеть дрожжевые клетки, клеточные органеллы и некоторые клеточные процессы. Это включает в себя процесс брожения дрожжей, когда они поглощают сахар в растворе, где пузырьки газа, поднимающиеся из дрожжевого раствора, означают брожение.

Другим клеточным процессом, который можно наблюдать, является почкование новых дрожжей, при котором некоторые дрожжевые растения могут иметь две неравные части, которые в конечном итоге отделяются друг от друга.